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细胞鉴定可以判断细胞是否有交叉污染和确认细胞系

作者:美德华生 发布时间:2023-06-02 12:19:56点击:346

细胞是否正确呢?

新买到的细胞或者实验室传了几代的细胞,又或者是储存于超低温冰箱几年不用的细胞, 需要用到时脑海里一直有着这样的问题困扰着你,被污染了么? 鉴定正确么?用它做研究会影响实验结果么?

据统计约30%细胞系被交叉污染或错误辨识,只因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这将浪费大量时间、精力和金钱。

世人皆知,细胞身娇体贵难养活,养好细胞实属不易。而这其中最烦的是污染、最怕的是掉包。因为尽管研究僧们有方法把一切污染的源头扼杀在摇篮之内,却没有火眼金睛辨别已经换了马甲的错误细胞。因而细胞一旦被李代桃僵,再资深的科研者都会阴沟里翻船,所以细胞鉴定显得尤为重要。

为什么要进行细胞系鉴定?

进行细胞系STR鉴定是很重要的。很多生物医药的研究都采用培养细胞来进行,这些细胞可能是受赠于其它研究人员,也可能是从细胞库(如美国 ATCC,American Type Culture Collection)得来。据估计,15-20%的实验室,实验中所使用的细胞已经不是原来的细胞系,或者与其它细胞系发生了交叉污染。显然,细胞系遭到污染、特征鉴别错误,将会极大的威胁着基于这些细胞而发表的论文质量和研究发现的正确性。

什么细胞最容易污染别的细胞?

Hela 细胞。五十多年来,Hela细胞系被广泛用于医学和生物学领域的研究,对当代生命科学的发展屡建奇功,是名副其实的生物学研究的亲历践行者。同时很多被广泛研究的细胞系都被Hela细胞淹没,因为它长得快,当你发现自己的一个培养瓶里的细胞突然长得很好,而以后都用它传代做实验的话,十之八九是搞错了。

什么情况下需要细胞鉴定?

1)当建立或获得一个新的细胞系时;

2)一个涉及到细胞试验项目开始/结束时;

3)在细胞冻存之前,或细胞已连续培养 2~3 个月时;

4)发表文章或申请课题经费前;

5)细胞系表现不稳定或结果与预期差别较大时;

6)当实验室使用超过一种细胞系时,所有细胞系最好先鉴定以排除交叉污染的可能;

如何根据STR数据判断细胞系身份?

收到细胞系鉴定结果以及 STR 信息,可以与参考数据库进行比对。如果细胞样本的每个 STR 位点和参考细胞 STR 位点都能重合匹配,即说明该细胞系正确,反之则说明你的细胞系可能被错误标记,交叉污染或发生遗传不稳定。一般说来,匹配度≥80%即可认为该细胞系正确,匹配度<80%则说明该细胞系的来源需要被怀疑。

如果细胞系被鉴定出发生交叉污染或错误标记,则需要拿更早代数的细胞进行鉴定,从而找到问题的起源或者直接从可靠的机构购买一株新的细胞系。